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菌落計數(shù)器的操作方法和流程
更新時間:2017-09-06   點擊次數(shù):4487次

菌落計數(shù)器廣泛用于食品、飲料、藥品、生物制品、化妝品、衛(wèi)生用品、飲用水、生活污水、工業(yè)廢水、臨床標(biāo)本中細(xì)菌數(shù)的檢驗,那么如何操作和使用菌落計數(shù)器呢?上海旦鼎來為您講解菌落計數(shù)器的操作方法和流程。

菌落計數(shù)器的操作方法和流程

菌落總數(shù)的測定,一般將被檢樣品制成幾個不同的10倍遞增稀釋液,然后從每個稀釋液中分別取出1mL置于滅菌平皿中與營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基混合,在一定溫度下,培養(yǎng)一定時間后(一般為48小時),記錄每個平皿中形成的菌落數(shù)量,依據(jù)稀釋倍數(shù),計算出每克(或每ml)原始樣品中所含細(xì)菌菌落總數(shù)。
基本操作一般包括:樣品的稀釋--傾注平皿--培養(yǎng)48小時--計數(shù)報告。
國內(nèi)外菌落總數(shù)測定方法基本一致,從檢樣處理、稀釋、傾注平皿到計數(shù)報告無何明顯不同,只是在某些具體要求方面稍有差別,如有的國家在樣品稀釋和傾注培養(yǎng)進(jìn),對吸管內(nèi)液體的流速,稀釋液的振蕩幅度、時間和次數(shù)以及放置時間等均作了比較具體的規(guī)定。
檢驗方法參見:
GB4789.2-94《中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗菌落總數(shù)測定》
SN0168-92《中華人民共和國進(jìn)出口商品檢驗行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)出口食品菌落計數(shù)》

1.操作方法:培養(yǎng)到時間后,計數(shù)每個平板上的菌落數(shù)。可用肉眼觀察,必要時用放大鏡檢查,以防遺漏。在記下各平板的菌落總數(shù)后,求出同稀釋度的各平板平均菌落數(shù),計算處原始樣品中每克(或每ml)中的菌落數(shù),進(jìn)行報告。
2.到達(dá)規(guī)定培養(yǎng)時間,應(yīng)立即計數(shù)。如果不能立即計數(shù),應(yīng)將平板放置于0-4℃,但不得*過24h。
3.計數(shù)時應(yīng)選取菌落數(shù)在30~300之間的平板(SN標(biāo)準(zhǔn)要求為25~250個菌落),若有二個稀釋度均在30~300之間時,按國家標(biāo)準(zhǔn)方法要求應(yīng)以二者比值決定,比值小于或等于2取平均數(shù),比值大于2則其較小數(shù)字(有的規(guī)定不考慮其比值大小,均以平均數(shù)報告)。
4.若所有稀釋度均不在計數(shù)區(qū)間。如均大于300,則取較為高稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。如均小于30,則以較為低稀釋度的平均菌落數(shù)乘稀釋倍數(shù)報告之。如菌落數(shù)有的大于300,有的又小于30,但均不在30~300之間,則應(yīng)以較為接近300或30的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。如所有稀釋度均無菌落生長,則應(yīng)按小于1乘以較為低稀釋倍數(shù)報告之。有的規(guī)定對上述幾種情況計算出的菌落數(shù)按估算值報告。
5.不同稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)與稀釋倍數(shù)成反比(同一稀釋度的二個平板的菌落數(shù)應(yīng)基本接近),即稀釋倍數(shù)愈高菌落數(shù)愈少,稀釋倍數(shù)愈低菌落數(shù)愈多。如出現(xiàn)逆反現(xiàn)象,則應(yīng)視為檢驗中的差錯(有的食品有時可能出現(xiàn)逆反現(xiàn)象,如酸性飲料等),不應(yīng)作為檢樣計數(shù)報告的依據(jù)。
6.當(dāng)平板上有鏈狀菌落生長時,如呈鏈狀生長的菌落之間無任何明顯界限,則應(yīng)作為一個菌落計,如存在有幾條不同來源的鏈,則每條鏈均應(yīng)按一個菌落計算,不要把鏈上生長的每一個菌落分開計數(shù)。如有片狀菌落生長,該平板一般不宜采用,如片狀菌落不到平板一半,而另一半又分布均勻,則可以半個平板的菌落數(shù)乘2代表全平板的菌落數(shù)。
7.當(dāng)計數(shù)平板內(nèi)的菌落數(shù)過多(即所有稀釋度均大于300時),但分布很均勻,可取平板的一半或1/4計數(shù)。再乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)作為該平板的菌落數(shù)。
8.菌落數(shù)的報告,按國家標(biāo)準(zhǔn)方法規(guī)定菌落數(shù)在1~100時,按實有數(shù)字報告,如大于100時,則報告前面兩位有效數(shù)字,第三位數(shù)按四舍五入計算。固體檢樣以克(g)為單位報告,液體檢樣以毫升(ml)為單位報告,表面涂擦則以平方厘米(cm2)報告

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