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分光光度計(jì)作為實(shí)驗(yàn)室中較為常用的儀器之一，從低端到，五花八門，大家在選擇時(shí)可能有些無(wú)所適從。而只有從實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際需要出發(fā)，才能挑選出較為合適的儀器。

①你們實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)應(yīng)用有哪些？未來(lái)會(huì)增加或改變嗎？

②你需要測(cè)量的樣品體積范圍？如果它變化很大，你需要著重考慮分光光度計(jì)的樣品量和靈活性。

③你是否需要同時(shí)測(cè)量多個(gè)樣品？

④你需要什么樣的靈敏度？對(duì)于低濃度樣品，3-5 nm的帶寬比窄帶寬（1 nm）儀器的一致性更好。

⑤有多少人會(huì)共用這一臺(tái)分光光度計(jì)？如果多人共用，預(yù)設(shè)程序可能會(huì)比較方便。有一些硬性指標(biāo)，在選購(gòu)時(shí)不得不看。分光光度計(jì)的波長(zhǎng)范圍是選購(gòu)時(shí)要考慮的重要因素之一。

自從03年Nanodrop推出*微量分光光度計(jì)，立即受到各分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的一致追捧和好評(píng)。僅需0.5-1ul的樣品體積，對(duì)于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō)，不僅意味著大大減少檢測(cè)損耗的樣品，也因?yàn)闄z測(cè)光徑減小而減少了對(duì)高濃度樣品如核酸或蛋白進(jìn)行梯度稀釋的需求，實(shí)在太方便。近期的*微量分光光度計(jì)市場(chǎng)可真是熱鬧，各*如NanoDrop、BioTek、島津等，都爭(zhēng)相推出了力作。讓人欣喜的是，我們還看到了可與*媲美的國(guó)產(chǎn)分光光度計(jì)，這說(shuō)明國(guó)內(nèi)的儀器市場(chǎng)也在不斷地創(chuàng)新。因此，如何選擇一臺(tái)合適的微量分光光度計(jì)顯的尤為重要。

在生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，一臺(tái)覆蓋紫外光和可見(jiàn)光的分光光度計(jì)是*的。分光光度計(jì)的帶寬（bandwidth）很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度。一種嚴(yán)格帶寬使得儀器能對(duì)復(fù)雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光測(cè)量。對(duì)于定量分析而言，3-5nm比較合適。可變的單色儀的狹縫寬度能使一臺(tái)分光光度計(jì)滿足多種實(shí)驗(yàn)需要，當(dāng)然，價(jià)格也更高。在檢測(cè)器方面，CCD陣列更為普及。它具有非常高的量子效率、噪聲比光電二極管陣列低100倍，不僅光利用率得到改善，信噪比也得以提高。

另外，CCD陣列系統(tǒng)采用模塊化處理，使儀器在穩(wěn)定性方面更優(yōu)于如光電倍增管（PMTs）等單點(diǎn)真空管檢測(cè)器。樣品量也是重要的考量因素。以前的比色皿，動(dòng)輒50 ul，對(duì)于珍貴樣品來(lái)說(shuō)那可真是大出血。

因此現(xiàn)在面向分子生物學(xué)的分光光度計(jì)都趨向于微量化了（揮發(fā)性樣品不宜）。近期推出的幾款分光光度計(jì)，都無(wú)需比色皿，將樣品滴在特殊的表面上即可測(cè)量，所需的樣品量在2 ul或以下。這種方法檢測(cè)范圍*寬，無(wú)需對(duì)樣品進(jìn)行稀釋。稀釋樣品不僅耽誤時(shí)間，在準(zhǔn)確性上也是大打折扣。

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